石蜡包埋的组织切片实验
材料与试剂

水浴锅
加冰容器
玻璃显微镜载玻片
薄片切片机和刀片
烘箱
切片步骤

切片前在冰上冷却石蜡包埋的组织块。(冷蜡可为组织标本内较硬的成分提供支撑,以此获得较薄的切片。从融冰中渗入组织块的少量水分也会使组织更容易切割。)
在水浴槽中注入超纯水,加热至40℃至45℃。
将刀片放入固定卡槽中,确保其被牢固固定,并设置间隙角。(间隙角防止刀片面与石蜡块表面接触)
按照切片机生产商的说明书设置间隙角。(刀片角度通常介于1°和5°之间)(图1)
图1:刀片间隙角。刀片的间隙角防止刀片面与石蜡块表面接触。应调整刀片间隙角,以实现最佳性能。
插入石蜡块并定位,以便切片时刀片可以垂直穿过组织块。
小心地用刀片接近组织块并切几个薄片,以确保定位正确。必要时进行调整。
将蜡块修剪为正方形(便于切割),暴露组织表面。(修剪通常在10~30μm的厚度范围内进行。切片厚度大约为4~5μm,可能需要丢弃前几个切片,因为其可能含有因修剪而造成的孔洞)。
用镊子拾起连续切片,使其浮在水浴槽的水面上并展平。
用镊子分离切片。
用显微镜载玻片从水浴槽中捞出切片,并将其直立存放在玻片架中。
将玻片架放入烘箱中,使切片在60℃下干燥2~3小时。




















