摘要：本实验采用固相萃取结合高效液相色谱的方法，建立了辣椒油中罗丹明B的检测方法。样品经20%丙酮的正己烷溶液（V/V）提取，CleanertAlumina-N固相萃取柱净化，VenusilMPC18色谱柱（4.6×150mm，5µm，100Å）分离，水和甲醇为流动相进行洗脱，外标法进行定量。结果表明，罗丹明B添加量为0.05mg/kg时，回收率在90%~100%之间，能够满足检测要求。
关键词:罗丹明B；VenusilMPC18色谱柱；CleanertAlumina-N
前言
罗丹明B(RhodamineB)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。经老鼠试验发现，罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤，被怀疑是致癌物质。罗丹明B在溶液中有强烈的荧光，用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。
因此通过有效的实验技术手段，对辣椒油中的有关罗丹明B残留进行监控，以确保消费者对辣椒油消费的安全具有重要意义。
本实验通过优化前处理方法建立了罗丹明B在辣椒油中的高效液相色谱的检测方法。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪（紫外检测器）；
博纳艾杰尔12位负压SPE装置。
试剂材料
丙酮、甲醇、正己烷为色谱纯；实验用水为超纯水；罗丹明B标准品（纯度99%）；
一次性无菌注射器；Nylon针式过滤器(0.45µm，直径13mm)；
CleanertAlumina-N固相萃取柱：2000mg/6mL
样品制备
样品提取
称取1g辣椒油于40mL玻璃瓶中，加入10mL20%丙酮的正己烷溶液（V/V），振荡摇匀后待净化。
样品净化
先将小柱用6mL正己烷活化平衡，然后将待净化液过柱，弃去全部流出液，然后用10mL20%丙酮的正己烷溶液（V/V）进行淋洗，最后用10mL2%氨化甲醇（V/V）洗脱。收集洗脱液于40℃氮气吹干，用1mL甲醇溶解残留物，过0.45µmNylon针式过滤器后待测。
以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。
实验条件
液相条件
色谱柱：VenusilMPC18，5µm，100Å，4.6×150mm
流动相：甲醇︰水=75︰25（V/V）
柱温：30℃
进样量：20µL
检测波长：550nm
结果与讨论
实验结果
由表1可知，采用固相萃取结合液相色谱法检测罗丹明B，辣椒油基质加标回收率在90%以上，能够满足标准要求。
表1.辣椒油中罗丹明B加标回收实验结果
结论
本实验建立了辣椒油中罗丹明B残留量的检测方法，并结合高效液相色谱对辣椒油中罗丹明B的含量进行了测定。对于加标量为0.05mg/kg的辣椒油样品，回收率在90%~100%之间，符合实验要求。
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