摘要:本实验采用高效液相色谱(HPLC)法结合紫外检测器,按照GB28314-2012食品安全国家标准食品添加剂辣椒油树脂标准方法,并选择Venusil○RXBPC18(L)(5µm,150Å,4.6×250mm)色谱柱对辣椒素有关样品进行了测定。结果表明:在波长为280nm,流动相为甲醇︰水=65︰35(v\v)时,测得的辣椒样品中天然辣椒素与二氢辣椒分离效果良好。

关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;辣椒素;Venusil○RXBPC18(L)色谱柱

前言

辣椒素是辣椒的活性成分,是辣椒中的主要辣椒元,二氢辣椒素位居第二。它对哺乳动物包括人类都有刺激性并可在口腔中产生灼烧感。纯辣椒素是一种斥水亲脂、无色无嗅的结晶或蜡状化合物。


实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

AgelaLC-10F高效液相色谱仪,紫外检测器;

试剂材料

甲醇为色谱纯;四氢呋喃为色谱纯;

天然辣椒素:白色固体粉末,由某食品公司提供;二氢辣椒素:白色固体粉末,由某食品公司提供;辣椒样品:由某食品公司提供;

高效液相色谱柱:Venusil®XBPC18(L);5μm,150Å,4.6×250mm。

样品制备

辣椒样品供试品溶液:取辣椒样品约1.0g,精密称定,用甲醇-四氢呋喃(1︰1)混合溶剂超声溶解,并定容至50mL,经0.45µm滤膜过滤,取续滤液5.0mL,加水5.0mL稀释,即得;

辣椒素混合标准溶液:分别称取天然辣椒素与二氢辣椒素标准品适量,加甲醇溶解并稀释制成每1.0mL中含1.0mg的溶液,混匀,取适量后,用甲醇-水(1︰1)稀释制成每1.0mL中含20µg的溶液,制成辣椒素混合标准溶液。

色谱条件

色谱柱:Venusil○RXBPC18(L);5μm,150Å,4.6×250mm;

流动相:甲醇︰水=65︰35(v\v);

流速:1.0mL/min;

柱温:30℃;

进样量:20µL;

波长:280nm。

结果与讨论

本实验采用Venusil○RXBPC18(L)色谱柱对辣椒样品中天然辣椒素及二氢辣椒素进行了测定,由图1、图2可知,在上述色谱条件下,待测物峰形良好。



结论

本实验按GB28314-2012食品安全国家标准食品添加剂辣椒油树脂标准方法,采用Venusil○RXBPC18(L)色谱柱对辣椒样品中天然辣椒素与二氢辣椒进行了测定。结果表明天然辣椒素峰与二氢辣椒素峰峰形良好,分离效果满足要求。

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